PCR扩增目的基因以后，怎么用琼脂糖电泳回收及纯化呢？希望高手指教！~
可以用回收试剂盒。举例如下：
DNA的回收使用AXYGEN公司AxyPrep DNA凝胶回收试剂盒，回收步骤如下：
1、 在紫外灯下切下含有目的DNA的琼脂糖凝胶，用纸巾吸尽凝胶表面液体并切碎。计算凝胶重量（提前记录1.5 ml离心管重量），该重量作为一个凝胶体积（如100 mg=100 μl体积）；
2、 加入3个凝胶体积的Buffer DE-A，混合均匀后于75 ℃加热，,间断混合（每2-3 min），直至凝胶块完全融化（约6-8 min）；
3、 加0.5个Buffer DE-B，混合均匀；
4、 吸取步骤3中混合液，转移到DNA制备管（置于2 ml( 试剂盒内提供)离心管）中，12,000×g离心1 min，弃滤液；
5、 将制备管置回2 ml离心管，加500 μlBuffer W1，12,000×g离心30 s，弃滤液；
6、 将制备管置回2 ml离心管，加500 μlBuffer W2，12,000×g离心30 s，弃滤液，用同样的方法再用700 μl Buffer W2洗涤一次12,000×g离心1 min；
7、 将制备管置回2 ml离心管，12,000×g离心1 min；
8、 将制备管置于洁净的1.5 ml离心管（试剂盒内提供）中，在制备膜中央加25-30 μlEluent，室温静置1 min，12,000×g离心1 min洗脱DNA。
如果片段较大，如几千kb以上建议用promega公司的回收试剂盒这样效果较好。
具体的步骤什么的回收试剂盒里均有说明书。
三博远志自用琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒，经过大量样品实验得出的最佳制品，本试剂盒回样品收差异小得率高，操作简便，质量非常稳定，每天自用掉2000次，经得起考验，三博远志PCR测序成功率高有试剂盒的功劳！可大量供货！
Sunbiotech DNA片段凝胶回收试剂盒，利用硅胶膜在低pH值和高盐状态下可特异性吸附DNA，在低盐高pH值洗脱的原理，可从TAE或 TBE琼脂糖凝胶中回收DNA片段，可去除PCR反应中的dNTPs、引物、矿物油和聚合酶等及DNA样品中的其它杂质，得到的DNA片段可用于酶切、连接、测序、PCR反应模板等后续操作。
试剂盒特点：
· 采用进口硅胶膜，吸附量大，产率高，实验结果可重复性好。
· 使用了优质溶胶液，不含传统溶胶液的碘化钠和高氯酸盐，不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。
· 独特的溶胶液/结合液配方，将溶胶和结合两种功能统一，因此一个试剂盒可以运用于琼脂糖DNA回收，也可以PCR产物清洁纯化酶切产物纯化回收等多种功能。
· 快速、方便，不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。
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各位朋友,我想从琼脂糖凝胶中回收cDNA,可以跟回收DNA一样地进行操作吗?希望给点指导,谢谢! - ******
#边炉# 琼脂糖凝胶中没法回收cDNA.如果你想纯化的活可以直接用乙醇沉淀或者用试剂盒纯化.主要是去掉一些蛋白,盐,小片段. cDNA电泳基本看不见,就算是看见了也不是你要的.畅搐扳诽殖赌帮涩爆绩一般目标cDNA量很少,而且长短不一. 象我们电泳RNA时,最亮的两个带,根本不是mRNA.
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制作琼脂糖凝胶时候为什么要加TBE 缓冲剂?? - ******
#边炉# 用水的话会使得凝胶电阻很大,电泳过程中电流小、发热量大,DNA泳动效率低. 所以配制琼脂糖凝胶一定要用缓冲液配制.里面的离子可以作为电导体.
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博凌科为的GoldenView 核酸染料使用时需不需要特别注意一些问题?有比较清楚的吗? - ******
#边炉# 注意事项1. 胶厚度不宜超过 0.5cm,胶太厚会影响检测的灵敏度.2. 加入 GoldenView 的琼脂糖凝胶反复融化可能会对核酸检测的灵敏度产生一定影响,但不明显.3. 通过凝胶电泳 回收 DNA 片段时,建议使用 GoldenView 染色,在自然 光下切...
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做琼脂糖凝胶电泳需要注意哪些问题 - ******
#边炉# 凝胶电泳操作注意事项: 1. 缓冲系统:在没有离子存在时,电导率最小,DNA不迁移,或迁移极慢,在高离子强度的缓冲液中,电导很高并产热,可能导致DNA变性,因此应注意缓冲液的使用是否正确.长时间高压电泳时,常更新缓冲液或在...
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PCR纯化的方法 - ******
#边炉# 先用溶液溶解含DNA的琼脂糖凝胶,然后加入有吸附柱的离心管中 吸附柱吸附DNA 离心,将含琼脂糖的溶液去除;接下来加入去盐的漂洗液进一步去除杂质;因PH值的原因,DNA还是吸附在吸附柱上的膜上;最后
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为什么在rna琼脂糖凝胶电泳时,样品在加入到凝胶上之前要先在65oc下处理15min - ******
#边炉# RNA有双链的吗? 65度是为了让RNA部分结合成双连的地方分开 以保证你跑出来的rna是单恋的
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影响核酸泳动距离的因素有哪些 - ******
#边炉# 1、核酸的性质 核酸的电荷量,分子大小,分子的空间构象等决定了不同的核酸分子具有不同的迁移率.对于线状双链DNA分子,在凝胶电泳中,分子量的常用对数与泳动 率成反比关系,一般双链DNA基本上不存在影响迁移率的复杂构象,但...
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我要提的230bp的DNA ,请问是用2%的还是1.5%的琼脂糖好? - ******
#边炉# 如果是检验DNA,这么小分子量的最好用丙烯酰胺胶. 要分辨这么小分子量的DNA,用4%的琼脂糖会好些,但是胶非常不好熔. 如果是分离的话,1-1.5%的胶就够了,但是如果有二三百bp的非目标片段就非常恶心了,琼脂糖分不开他们,切胶时都在一起.
#13963948421#
为什么融胶法回收DNA中,琼脂糖凝胶加入盐溶液,如NaI就能溶解? ******
#边炉# 你要明白,琼脂是有机物,并且可认为是糖结构.往往实验用的里面有酚酞. 你说的NaI我没见过类似题目,但我见过MgBr,同是卤族,我想原理差不多,是Br离子电泳缘故 http://cache.baidu.com/c?m=9d78d513d9d430aa4f9ae2697b12c...
#13963948421#
胶回收DNA直接测序琼脂糖做胶回收DNA时最后一步把DNA从分析柱上洗脱下来需要用去离子水吗,用试剂盒里的EB洗脱缓冲液有什么影响吗?试剂盒用的... - ******
#边炉#[答案] 水和洗脱液都可以,没什么区别. 实验室一般用40-50℃的水比较多,原因我也不清楚,
