大肠杆菌作为基因工程受体菌具有哪些特点

大肠杆菌作为基因工程受体菌的特点:

1、发酵产品具有高浓度、高转化率和高产率。

2、菌株能利用常用的碳源,并可进行连续发酵。

3、菌株不是致病株,也不产内毒素。

4、代谢控制容易进行。

5、能进行适当的DNA重组,并且稳定。

扩展资料:

检验方法:

1、发酵法:

这种方法主要是在44.5℃下的培养基上进行大肠杆菌的培养,该培养基含有荧光底物,需要培养 24 h。

然后对荧光底物进行释放,需要采用葡萄糖醛酸进行,让培养基能够在紫外光的照射下发出荧光。采用这样的方式方法,还可以进行统计学估计原来样品中的菌落。

主要步骤包括发酵、分离培养、二次发酵、显微镜观察等。

2、滤膜法:

该方法主要过程:加入 10 mL 左右的无菌水于滤器中,然后掺入一些无菌水进行清洁滤器的内壁,再进行过滤,将滤膜放在 M-FC 培养基中,两者之间不能够有气泡,然后进行密封。

存放温度为 44.5℃,存放时间约 24 h,直到大肠杆菌的菌群变成蓝色或蓝绿色。然后记录数据,估算每一单位的水溶液菌群数量,然后进行大肠杆菌量值的换算。

3、平板计数法:

用无菌吸管吸取稀释度样品1 mL,该样品与乳糖胆盐发酵类似,然后将其放入无菌培养皿中,再加入温度于 45℃下的 CDLJ JD 显色培养基中10 mL的量,并进行培养皿中溶液均匀混合。

可以通过快速转动培养皿的方式,等溶液凝固以后,加入5 mL左右,然后快速摇晃培养基,使其可以均匀覆盖平板表面,等其凝固以后,翻转培养基,在温度37℃中培养24 h左右,然后观察其形态,颜色等变化。

除此之外,平行设置两个稀释度培养基,步骤是先稀释样本,通过稀释后,微生物可以分散为单个细胞,然后进行一定环境条件下培养,直到其长成菌落为止,然后进行计算大肠杆菌的数量,通过稀释度和样本数量进行计算。

4、免疫磁珠法:

该分离技术的主要原理是以磁珠为载体和抗体,进行抗体和磁珠的结合,然后通过磁力技术完成力学的移动,进而分离大肠杆菌。

与其他分离细菌的方式相比,这样的方式方法具有一定的优点,该技术可以提升样本中病原性弧菌的检测成功率,并且免疫磁珠技术可以于不同菌种中对不同的微生物进行处理,进而在很大程度上提高检测效率 。

5、自动化仪器检测法:

主要是运用免疫自动化分析仪,该技术产生并运用于1970年。

随着科技的发展和进步,自动化仪器检测技术应用非常广泛,并且操作起来非常方便,可以节约很多时间,其受干扰的程度较小,可以节省人力物力的投入,也可以提高检测的精确度。

在现阶段的发展过程中,自动酶的免疫检测体系的应用非常广泛。

6、ATP生物发光法:

在近些年的发展过程中,生物发光技术应用很广泛,是一种比较快速的检测微生物的技术。

在活性细胞中,ATP是其常见的能量代谢产,可以提供细胞生理活动过程中所需的能量。并且,该技术可以在生物体内可以在一定范围内保持一定的含量。

食品中的大肠杆菌检测技术可以采用荧光光度的方法,因为生物体发光的原因是有荧光素酶的作用,产生了发光的效果。

该物质来源于北美的萤火虫体内,可以催化荧光素的氧化作用,不过,该物质性质不稳定,可以对荧光进行快速分解。另外,该检测技术结果获得过程是非常快的,并且该设备携带方便,十分适用于现场检测。

参考资料来源:百度百科-基因工程菌

参考资料来源:百度百科-大肠杆菌





优点:

1、遗传背景清楚。目标基因表达水平高,表达系统成熟完善。

2、易于培养(培养方法简单、生长快、培养周期短、抗污染能力强)、成本低,被美国FDA批准为安全的基因工程受体生物。

缺点:

1、表达产物缺少饭以后的修饰(如糖基化、烷基化、磷酸化、特异性的蛋白水解加工等);同时高表达时易折叠错误导致表达产物没有活性,而且大肠杆菌本身含有内毒素和有毒蛋白,可能混在产物里,应用受限。

2、真核生物的启动子不能被原核细胞(大肠杆菌)的RNA聚合酶识别。

3、真核生物的mRNA上没有SD序列,因此不能被原核细胞核糖体结合。

4、真核生物的基因含有内含子,原核细胞缺乏见他们的转录物进行拼接加工的机制。

5、真核细胞的基因产物,往往需要翻译后加工,真核细胞缺乏翻译后加工有关的酶。

6、真核生物基因表达的蛋白质易被原核细胞蛋白酶所降解。

扩展资料:

基因工程菌应具备以下条件:

1、发酵产品具有高浓度、高转化率和高产率;

2、菌株能利用常用的碳源,并可进行连续发酵;

3、菌株不是致病株,也不产内毒素;

4、代谢控制容易进行;

5、能进行适当的DNA重组,并且稳定。

参考资料来源:百度百科-大肠杆菌

参考资料来源:百度百科-基因工程

参考资料来源:百度百科-基因工程菌



大肠杆菌作为基因工程受体菌具有哪些特点
遗传背景清楚 ;目标基因表达水平高;表达系统成熟完善;易于培养(培养方法简单、生长快、培养周期短、抗污染能力强)、成本低;被美国FDA批准为安全的基因工程受体生物.
缺点:表达产物缺少饭以后的修饰(如糖基化、烷基化、磷酸化、特异性的蛋白水解加工等);同时高表达时易折叠错误导致表达产物没有活性,而且大肠杆菌本身含有内毒素和有毒蛋白,可能混在产物里,应用受限.
真核基因在大肠杆菌中表达:
1,真核生物的启动子不能被原核细胞(大肠杆菌)的RNA聚合酶识别;
2,真核生物的mRNA上没有SD序列,因此不能被原核细胞核糖体结合;
3,真核生物的基因含有内含子,原核细胞缺乏见他们的转录物进行拼接加工的机制;
4,真核细胞的基因产物,往往需要翻译后加工,真核细胞缺乏翻译后加工有关的酶;
5,真核生物基因表达的蛋白质易被原核细胞蛋白酶所降解.

大肠杆菌作为基因工程菌的受体菌有哪些特点真和基因在大肠杆菌存在哪些障碍~

遗传背景清楚 ;目标基因表达水平高;表达系统成熟完善;易于培养(培养方法简单、生长快、培养周期短、抗污染能力强)、成本低;被美国FDA批准为安全的基因工程受体生物。缺点:表达产物缺少饭以后的修饰(如糖基化、烷基化、磷酸化、特异性的蛋白水解加工等);同时高表达时易折叠错误导致表达产物没有活性,而且大肠杆菌本身含有内毒素和有毒蛋白,可能混在产物里,应用受限。
真核基因在大肠杆菌中表达:1,真核生物的启动子不能被原核细胞(大肠杆菌)的RNA聚合酶识别;2,真核生物的mRNA上没有SD序列,因此不能被原核细胞核糖体结合;3,真核生物的基因含有内含子,原核细胞缺乏见他们的转录物进行拼接加工的机制;4,真核细胞的基因产物,往往需要翻译后加工,真核细胞缺乏翻译后加工有关的酶;5,真核生物基因表达的蛋白质易被原核细胞蛋白酶所降解。

优点的话 相当多,比如代时短,易培养,研究充分,便于科研者改造,对绝大多数质粒载体适用,相关信息丰富,易表达,好多好多,所以大家都在用。但是它也存在局限性,比如表达的外源蛋白多为不可溶的(包涵体),在真核生物或病毒蛋白的表达上尤为突出,当然这些也可以通过纯化后的复性等手段使其重新获得活性,但是并不是都能够成功的。因此就有人采用枯草芽孢杆菌、酵母菌甚至是杆状病毒等其他的表达系统以期获得理想的结果。还有什么疑问,可以继续追问!

#18978328213# 酵母菌和大肠杆菌都具有什么 - ******
#鄂沾# 是人体内的一种正常菌群,大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli) 革兰氏阴性短杆菌,大小0.5*1~3微米.周身鞭毛,能运动,无芽孢.能发酵多种糖类产酸、产气,是人和动物肠道中的正常栖居菌,婴儿出生后即随哺乳进入肠道,与人终身相伴...

#18978328213# 大肠杆菌常作为基因工程的受体细胞是由于什么? - ******
#鄂沾#[答案] 大肠杆菌有一种叫做EcoRI的限制酶,能够专一识别GAATTC的序列,并在G和A之间将这段序列切开

#18978328213# 基因工程用什么做受体细胞为什么 - ******
#鄂沾# 因工程常用原核生物作为受体细胞的原因:原核生物(比如大肠杆菌)作为受体细胞,是利用了原核生物的几个优点、遗传物质相对较少:繁殖快、多为单细胞

#18978328213# 大肠杆菌(E. coli)在植物基因工程中的主要作用?详细一点,谢谢! - ******
#鄂沾# 大肠杆菌里取出了两种不同的质粒,它们各自具有一个抗药的基因.科恩把两种质粒上不同的抗药基因"裁剪"下来,再把这两种基因"拼接"在同一个质粒中.当这种杂合质粒进入大肠杆菌体后,这些大肠杆菌就能抵抗两种药物,而且这种大肠杆菌的后代都具备双重抗菌性

#18978328213# 作为基因工程载体,其应具备哪些条件 - ******
#鄂沾# 1、在宿主细胞中能保存下来并能大量复制,且对受体细胞无害,不影响受体细胞正常的生命活动. 2、有一定的标记基因,便于进行筛选.如大肠杆菌的pBR322质粒携带氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因,就可以作为筛选的标记基因.一...

#18978328213# 将基因导入大肠杆菌的载体有哪些 - ******
#鄂沾# 作为基因工程载体的共有三类:质粒,动植物病毒,噬菌体的衍生物. 动植物病毒理论上是可以的,但从实际操作上来说质粒更常用.

#18978328213# 基因工程常用的受体有哪些? ******
#鄂沾# 植物细胞,动物细胞都可以,微生物也行,如大肠杆菌,土壤脓杆菌. 受体一般都要容易繁殖和存活的,所以人们都用细菌,或者酵母菌,大肠杆菌等细菌.

  • 大肠杆菌为什么是理想的受体细胞
  • 答:未经过处理的大肠杆菌不易接受外源DNA,故不适合做基因工程受体细胞。大肠杆菌必需经过钙离子的处理,使细胞的通透性发生改变(即处于感受态)易于接纳外源DNA,这样才可以做受体细胞。载体的主要用途是将目的基因带入受体细胞且对受体细胞的生存不会产生太大影响。 大肠杆菌里本来就有质粒,换句话说,质粒...

  • 大肠杆菌为什么是理想的受体细胞
  • 答:(1)研究得最为详尽的原核细菌 (2)成熟的基因克隆表达受体细胞 因为大肠杆菌是细菌,酵母菌是真菌。(一个是原核细胞一个是真核细胞)。它们基因的结构不同。真菌是真核细胞,基因中有内含子、外显子等多种。(3)繁殖迅速,培养代谢易于控制 ...

  • 大肠杆菌是生物学及医学实验研究中最有代表性的模式生物之一。_百度知 ...
  • 答:模式生物的一般特点是:1)其生理特征能够代表生物界的某一大类群 2)容易获得并易于在实验室内饲养繁殖 3)世代短子代多遗传背景清楚 4)容易进行实验操作,特别是遗传学分析 一般就是大肠杆菌做为基因工程菌,它的优点:(1)研究得最为详尽的原核细菌 (2)成熟的基因克隆表达受体细胞 (3)繁殖迅速...

  • 为什么大肠杆菌,枯草杆菌和农杆菌,酵母菌常作基因工程中的受体细胞
  • 答:2.在基因水平上,人和细菌的遗传机制是一致的。细菌和人的遗传物质都是DNA,都使用同一套遗传密码子,都遵循中心法则。因此,通过基因重组,细菌能够合成人体的某些蛋白质。(不光是人,所有的生物都共用一套遗传密码子)3.生周期短,繁殖快,常用于发酵工程,以便快速得到结果或实现经济效益 希望对你有...

  • 三、目前常用的受体细胞?1、大肠杆菌2、枯草杆菌3、蓝细菌4、棒状杆菌5...
  • 答:受体细胞也叫宿主细胞。目前常用受体细胞分为:一、原核细胞 1、大肠杆菌 革兰氏阴性菌,优点:基因组、遗传背景了解最清楚是最常用的原核受体细胞;易培养、繁殖迅速。2、枯草杆菌 革兰氏阳性菌,优点:具胞外酶分泌-调节基因,能将表达产物分泌到培养基;无内毒素;易于保存与培养。3、蓝细菌 优点:光能...

  • 在基因工程中,如果以大肠杆菌做受体细胞,通过鸟枪法获取目的基因,为什么...
  • 答:因为大肠杆菌是原核生物,酵母菌是真核生物。真核生物在合成信使RNA时,是先DNA完全转录形成RNA,之后再切除内含子部分转录成的RNA,形成成熟的信使RNA,参与翻译形成蛋白质。而鸟枪法是用酶直接切下一段DNA,假如供体是真核细胞,切下来的部分自然会含有内含子,并且进入受体之后那部分内含子转录成的RNA...

  • 比较大肠杆菌、植物和动物三种不同系统作为基因工程宿主的优缺点 我也...
  • 答:因表达调控机制有了清楚的了解;(2)易于大规模培养,成本 低廉;(3)经过了遗传改造,已发展为一种安全的基因工程 实验系统,拥有各种不同的菌株和载体系列。不足之处(表达真核基因的障碍)(1)真核基因具有内含子,所以只能用其cDNA;(2)许多真核生物基因仅在大肠杆菌中 合成无特异性空间结构的...

  • 为什么大肠杆菌是目前应用最广的外源基因表达体系
  • 答:3. 表达水平一般较真核系统高,某些外源基因在大肠杆菌中的表达量可达总蛋白的5 %~30 %,且下游工艺简单、易于控制。4、全基因组测序,共有4405个开放型阅读框架;5、基因克隆表达系统成熟完善;6、繁殖迅速,培养简单、操作方便、遗传稳定;7、被美国FDA批准为安全的基因工程受体生物。

  • 大肠杆菌遗传物质
  • 答:注意:DNA和RNA不同的碱基主要是胸腺嘧啶(thymine)和尿嘧啶(uracil)。大肠杆菌遗传物质所在的区域叫拟核区(也称作染色质体)。拟核区存在于原核生物,没有染色体,没有由核膜包被的细胞核,只有一个位于形状不规则且边界不明显区域的环形DNA分子,内含遗传物质。拟核携带着细菌全部遗传信息,它的功能是...

  • lb培养基培养什么微生物
  • 答:LB培养基通常用来培养基因工程受体菌(大肠杆菌),这类菌通常是经过改造无法在外界环境单独存活和扩增的工程菌。培养这类工程菌,我们可以表达大量的外源蛋白。因此LB培养基通常在基因工程、分子生物学中使用比较多。LB琼脂培养基为一种实验室中广泛使用的普通培养基。主要成分为胰蛋白胨、酵母浸粉、琼脂、...

    为传递更多家电数码信息,若有事情请联系
    数码大全网