影印培养试验的内容

其基本过程是:把长有许多菌落(可多达数百个)的母种培养皿倒置于包有 灭菌丝绒布的木圆柱(直径略小于培养皿)上,然后可把这一“印章”上的细菌一一接种到不 同的选择性培养基平板上,待培养后,对各皿相同位置上的菌落作对比后,就可选出适当的突 变型。据报道,用这种方法,可把母平板上10~20%的细菌转移到绒布上,并可利用它接种8 个子培养皿。因此,通过影印培养法,可以从在非选择性条件下生长的细菌群体中,分离出各 种类型的突变种。
右图就是利用影印培养技术证明大肠杆菌K12自发产生抗链霉素突变的实验。大致方法是:首先把大量对链霉素敏感的大肠杆菌K12涂布在不含链霉素的平板(1)的表面,待 其长出密集的小菌落后,用影印法接种到不含链霉素的培养基平板(2)上,随即再影印到含有 链霉素的选择性培养基平板(3)上。影印的作用可保证这3个平板上所生长的菌落的亲缘和相 对位置保持严格的对应性。经培养后,在平板(3)上出现了个别抗链霉素的菌落。对培养皿(2 )和(3)进行比较,就可在平板(2)的相应位置上找到平板(3)上那几个抗性菌落的“孪生兄弟”。然后把平板(2)中最明显的一个部位上的菌落(实际上是许多菌落)挑至不含链霉素的培养 液(4)中,经培养后,再涂布在平板(5)上,并重复以上各步骤。上述同一过程几经重复后,只要涂上越来越少的原菌液至相当于平板(1)的培养皿(5)和(9)中,就可出现越来越多的抗性菌落,最后甚至可以得到完全纯的抗性菌群体。由此可知,原始的链霉素敏感菌株只通过(1)→ (2)→(4)→(5)→(6)→(8)→(9) →(10)→(12)的移种和选择序列,就可在根本未接触链霉素的情况下,筛选出大量的抗链霉素的菌株。



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提问有问题,建议你先了解一下什么是“影印平板法”。
影印接种法
具体过程是:将待测的浓缩菌悬液涂在合适的平板上,等其长好后作为母平板(每平板上的菌落控制在50~300个);用一小块灭菌的丝绒固定在直径较平板略小的圆柱形木块上,构成印章(即接种工具);然后把长有菌落的母平板倒置在丝绒的印章上,轻轻印一下;再把此印章在另一含有选择培养基的平板上轻轻印一下,经培养后,选择培养基平板上长出的菌落与母平板上的菌落位置对应,比较影印平板与母平板上菌落生长情况,即可从相应位置的母平板上选出待测的突变型菌落。影印法最初是为证明微生物的抗药性突变是自发的、与相应的环境因素无关而设计的实验,目前已广泛应用于营养缺陷型的筛选以及抗药性菌株筛选等研究工作中。

#18320324039# 高级抗生素产生的耐药细菌 - ******
#丘彦# 三代头孢类药物对几类细菌有很好的效果.由于抗生素的滥用和环境中接触,某些细菌对一代头孢产生了严重耐药,这时三代的效果很好.你们服药是治疗呼吸道疾病吗?怎么知道别人会传染给你?现在医生给你开的一代,说明在临床标本检验(如痰培养等)中,在你体内分离到的细菌 使用一代药物有效,这算一件好事.你体内的病原菌对药物的作用敏感,尚不需要动用三代头孢.领到药品时应该有“请遵医嘱”几个字吧?不根据临床检查结果,私自服药,可是后果自负哦~ 如果万一感染上别人的病原菌,可能一代会失效,医院有专门的药敏试验来检测的.不要杞人忧天了.祝你早日康复

#18320324039# 证明基因突变的自发性和不对应性的实验有哪几个 - ******
#丘彦# 基因突变自发性和不对应性实验证明,三个经典实验:变量实验,涂布实验,影印实验 突变的性状与引起突变的原因间无直接对应关系! 变量实验(fluctuation test) Salvador Luria and Max Delbruck(1943) Newcombe的涂布实验(1949) 影印...

  • 某质粒上有SalI、Hindm、BamHI三种限制酶切割位点,同时还含有抗四环素...
  • 答:因此导入重组质粒的农杆菌能在含有氨苄青霉素的培养基上能生存,但不能在含有四环素培养基上生存,所以培养基A和培养基B分别还含有氨苄青霉素、四环素,含目的基因的是4和6菌落中的细菌.探针是指用放射性同位素标记的目的基因(抗盐基因).除了从分子水平上进行检测,还可以从个体水平上进行鉴定,即用...

  • 回答下列有关遗传信息传递表达和基因工程的问题.?表中列出了几种限制...
  • 答:从而形成新的限制酶切位点,即可被Mse I酶识别.(4)由图可知,质粒上含有两个抗性基因,即四环素抗性基因和青霉素抗性基因.对质粒进行改造时,已将青霉素抗性基因破坏,所以含重组质粒的大肠杆菌能在含有四环素的培养基上生存,但在含有青霉素的培养基上不能生存.所以图中培养基除了含有细菌生长繁殖必需...

  • 刍议如何将剪报应用于农村中职写作能力培养中
  • 答:在教学中,我把加强课外阅读作为培养学生积累语言文字能力的关键来抓。适时指导学生摘录好词佳句,并适当朗读或背诵一些片段,丰富学生的语言素材。学生利用课余时间装订剪报,这些剪报分类装订,形式多样,内容丰富,可读性很强。班里自发组成的知识角的书刊每月更换一次,尽可能地为学生提供更多的材料。“海纳百川,有容乃大;...

  • 求经典散文或散文佳句
  • 答:他看著父亲青年时代有神采的照片,有如隔著迷蒙的毛玻璃,看著自己被翻版的脸,他不仅影印了父亲的形貌,也继承了父亲一生在岁月之舟裏流浪的悲哀。那种悲哀,拍照时犹青年的父亲是料不到的,也是他在中年以前还不能感受到的。 他决定到母亲的坟前祭拜. 火车愈近杭州,他愈是有一种逃开的冲动,因为他不知道在母亲的...

  • 土壤微生物分离计数的方法
  • 答:用培养基的方法来分比较麻烦,而且土壤中90%以上的菌是不可培养的……如果只是想做到群落水平的话,可以试试Biolog分析、磷脂脂肪酸分析和总DNA分析等方法,这些方法能研究和表征那些现在还不能够被培养的土壤微生物。

  • 谁能给我一篇完整的有关兰花识别方法的文章
  • 答:这一现象之所以能吸引育种学家的目光,主要原因是原来需要常规栽培许多年才能开花的人工杂交新品种,现在在试管里,通过1~2个培养周期就能人为地促使其开花,这样就可以根据开花的情况有目的地选育具有优良性状的个体,淘汰相对较差的个体,从而使整个育种的周期缩短,并大大减轻大量栽培未见花品种的工作量,使育种工作更富有...

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  • 答:5.介绍自己的潜能。6.向用人单位介绍自己曾经担任过的各种社会工作及取得的成绩,预示着自己有管理方面的才能有发展、培养的前途。7.附上有关材料或文件。8.自荐信上应当说明信中所附的有关资料文件,如毕业证书、学位证书、获奖证书的影印件,发表作品的影印件,学校的推荐信或毕业生推荐表等,给对方...

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