RNA提取中加入氯仿和异丙醇的原因

作为有机溶剂变性蛋白,使其沉淀并通过离心除去,同时也通过变性作用抑制RNase活性。RNA提取试剂中通常含有苯酚,苯酚微溶于水,抽提烷之后水相里有痕量的酚,如果不除去会损伤核酸,需要通过氯仿把水相里参与的苯酚抽提掉。

RNA是以DNA的一条链为模板,以碱基互补配对原则,转录而形成的一条单链,主要功能是实现遗传信息在蛋白质上的表达,是遗传信息向表型转化过程中的桥梁。

扩展资料:

如果说mRNA是合成蛋白质的蓝图,则核糖体是合成蛋白质的工厂。但是,合成蛋白质的原材料——20种氨基酸与mRNA的碱基之间缺乏特殊的亲和力。

由于DNA和RNA在化学组成与分子结构上存在一定的差别,因而对不同的染料有着不同的反应。所以,可以根据这一反应差异,来研究细胞中DNA与RNA的分布情况,RNA主要分布在细胞质中。

与DNA不同,RNA一般为单链长分子,不形成双螺旋结构,但是很多RNA也需要通过碱基配对原则形成一定的二级结构乃至三级结构来行使生物学功能。

参考资料来源:百度百科--核糖核酸



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#18721611180# SDS碱裂解法提取质粒DNA中加酚氯仿离心后加异丙醇的作用?SDS碱裂解法提取质粒DNA中加酚氯仿离心后为什么加异丙醇,即异丙醇的作用是什么?还... - ******
#晁真#[答案] 异丙醇可以沉淀DNA和RNA(即核酸) 静置是为了增加沉淀效果

#18721611180# RNA提取的原理 - ******
#晁真# TRIZOL裂解细胞 氯仿萃取 异丙醇沉淀 酒精清洗

#18721611180# RNA提取中几种有机溶液的配制及保存问题 - ******
#晁真# 我的问题是:你采取了什么措施来降低或者杜绝 RNase 的污染?具体地: 你是如何选择、预处理、使用和保存氯仿和异丙醇?你是如何配制和保存 75% 乙醇? 坦率地讲,因为有机试剂的问题导致抽提失败,我真没有听到;或许有的问题是由...

#18721611180# 提取和纯化RNA时,为什么经氯化锂,异丙醇和乙醇多次纯化是中科院的考博题目,就是这样问的 - ******
#晁真#[答案] 我做的时候从来没用过氯化锂,也没有用异丙醇多次纯化. 异丙醇不是用来纯化是用来沉淀RNA的,纯化在加入TRIZOL的时候已经把DNA和蛋白质分离开了.乙醇是为了清洗留在RNA里的部分异丙醇,也不是纯化的作用.

#18721611180# 怎么提取RNA? - ******
#晁真# 我们实验室用的是TRIZOL试剂盒,原理就是先组织匀浆,然后将RNA与蛋白质等分离,这个用的是戊二醇,然后再用柱子加各种溶剂,各种12000r/min离心,多次离心之后,经过洗涤干燥,再溶于DEPC水就可以冷藏了. 整个实验中要注意尽量避免实验材料与空气接触,以免被RNA酶降解其中的RNA,要知道RNA酶可是无处不在啊,还有DEPC是有毒的(一般分子实验所用的都多多少少有毒...),所以要小心~

#18721611180# SDS碱裂解法提取质粒DNA中加酚氯仿离心后加异丙醇的作用? - ******
#晁真# 异丙醇可以沉淀DNA和RNA(即核酸) 静置是为了增加沉淀效果

#18721611180# 请问为什么在TRIzol加入氯仿后,溶液分为水相和有机相,RNA在水相中,然后可以用用异丙醇可沉淀回收RNA呢. - ******
#晁真# trizol的主要成分是苯酚,可溶于氯仿(有机相),蛋白质也溶于有机相,中层是DNA,RNA则溶于上层水相.用异丙醇回收,因为RNA不溶于异丙醇,会形成沉淀得到回收.

#18721611180# 求 RNA提取中 氯仿、异丙醇还有用95%乙醇洗涤分别所起的作用!! - ******
#晁真# 氯仿抽提蛋白 异丙醇沉淀RNA 乙醇洗掉DNA

#18721611180# Trizol法提取流感病毒 RNA - ******
#晁真# 1、取200ul样品数+阴性对照+阳性对照加入1.5ml灭菌eppendorf管;2、加600ul异硫氰酸胍,然后加入对照和样品,再加200ul氯仿,颠倒混匀;3、13000rpm离心15min;4、在第3步离心快结束时,另取同样多eppendorf管,加入400ul于-20℃...

#18721611180# 如何使用DNAase纯化RNA ******
#晁真# RNA纯化 1) 用酚氯仿抽提:这两种有机溶剂合用,比单独用酚抽提的除蛋白效果更佳.继而用氯仿抽提则可除去核酸制品中的痕量酚,先加入酚后加入氯仿.①核酸样品置有盖小离心管中,加入等体积的酚/氯仿(如有20ul样品,则加入10ul酚...

  • RNA提取原理
  • 答:随后进行离心。在酸性条件下,总RNA保留在上层水相中,而大部分DNA和蛋白质保留在中间相或下层有机相中。然后通过用异丙醇沉淀回收总RNA。RNase酶可以通过加入吡咯碳酸二乙酯(DEPC)来灭活。RNA提取时,加氯仿后分三层:水相(...

  • 提取总rna的过程中加入异丙醇的作用是什么
  • 答:异丙醇在提RNA中的作用是沉淀RNA. 氯仿抽提蛋白异丙醇沉淀RNA 乙醇洗掉DNA。

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  • 答:RIpure试剂是直接从细胞或组织中提取总RNA的试剂。它在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性。加入氯仿后离心,样品分成水样层和有机层。RNA存在于水样层中。收集上面的的水样层后,RNA可以通过异丙醇沉淀来还原。在除去水样层...

  • 提rna为什么加入1/5的氯仿
  • 答:氯仿的作用主要是萃取蛋白质等物质,使得RNA留在水相。

  • 提rna时加完氯仿忘记静置会怎样
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  • 求RNA提取中 氯仿、异丙醇还有用95%乙醇洗涤分别所起的作用!!
  • 答:氯仿抽提蛋白 异丙醇沉淀RNA 乙醇洗掉DNA

  • 异丙醇为什么能沉淀水相中的RNA
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  • 答:纯化那中RNA?mRNA?可以通过polyT的柱子纯化

  • 用trizol法提取RNA的方法及每一步的原理.
  • 答:TRIZOL是从细胞和组织中提取总RNA的即用型试剂,在样品裂解或匀浆过程中,TRIZOL能保持RNA完整性。加入氯仿后,溶液分为水相和有机相,RNA在水相中。取出水相,用异丙醇可沉淀回收RNA。※0.1%的8-羟基喹啉可以抑制RNase,...

  • 提取rna时,细胞裂解后加入氯仿的原因是什么
  • 答:3、80:4:16/氯仿:戊醇:乙醇 4、 RnaseA母液 5、其它试剂:液氮、异丙醇、TE缓冲液,无水乙醇、70%乙醇、3mol/L NaAc。四、操作步骤:1. 在50ml离心管中加入20ml提取缓冲液Ⅰ, 60℃水浴预热。2. 幼苗或叶子5-10g...

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