聚丙烯酰胺(PAGE)是由丙烯酰胺聚合形成的高分子,这个聚合反应是自由基聚合,需要有引发剂产生自由基将反应引发过硫酸铵就是引发剂,而TEMED可以催化过硫酸铵产生自由基,从而加速丙烯酰胺凝胶的聚合。
过硫酸铵作为氧化剂和漂白剂,被广泛地用于蓄电池工业;它还用作聚合的引发剂、纤维工业的脱浆剂;并可用作金属及半导体材料表面处理剂、印刷线路的刻蚀剂;还广泛用于石油开采的油层压裂,面粉和淀粉加工业、油脂工业, 在照相工业上用来除去海波。
扩展资料:
浓缩胶的作用是有堆积作用,凝胶浓度较小,孔径较大,把较稀的样品加在浓缩胶上,经过大孔径凝胶的迁移作用而被浓缩至一个狭窄的区带。当样品液和浓缩胶选TRIS/HCl缓冲液,电极液选TRIS/甘氨酸。
过硫酸铵检定和测定锰,用作氧化剂。漂白剂。照相还原剂和阻滞剂。电池去极剂。用于可溶性淀粉的制备。
用作醋酸乙烯、丙烯酸酯等烯类单体乳液聚合的引发剂,价格便宜,所得乳液耐水性较好。还用作脲醛树脂的固化剂,固化速度最快。亦用作淀粉胶黏剂的助氧化剂,与淀粉成分中的蛋白质反应提高粘接性,参考用量为淀粉的0.2%~0.4%。也用作金属铜表面处理剂。
参考资料来源:百度百科——过硫酸铵
参考资料来源:百度百科——TEMED
过硫酸铵就是引发剂,而TEMED可以催化过硫酸铵产生自由基,从而加速丙烯酰胺凝胶的聚合。
聚丙烯胺凝胶由单体丙烯酰腋甲叉双丙烯酰胺聚合而成,催化聚合的常用方法有两种: 化学聚合法和光聚合法。化学聚合以过硫酸铵(AP)为催化剂,以四甲基乙二胺(TEMED)为加速剂。
聚丙烯酰胺凝胶电泳简称PAGE ,是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术,用于分离蛋白质和寡核苷酸。
扩展资料:
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳经常应用于提纯过程中纯度的检测,纯化的蛋白质通常在SDS电泳上应只有一条带,但如果蛋白质是由不同的亚基组成的,它在电泳中可能会形成分别对应于各个亚基的几条带。
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳具有较高的灵敏度,一般只需要不到微克量级的蛋白质,而且通过电泳还可以同时得到关于分子量的情况,这些信息对于了解未知蛋白及设计提纯过程都是非常重要的。
参考资料:百度百科-聚丙烯酰胺凝胶电泳
聚丙烯酰胺(PAGE)是由丙烯酰胺聚合形成的高分子
这个聚合反应是自由基聚合,需要有引发剂产生自由基将反应引发
过硫酸铵就是引发剂,而TEMED可以催化过硫酸铵产生自由基,从而加速丙烯酰胺凝胶的聚合。
TEMED:引发剂,引发胶的凝聚
APS:增速剂,加快凝聚
加入乙醇或异丙醇是为了防止APS在空气中被氧化而活性降低,并且可以除凝胶上气泡,压平凝胶。
sds page 配胶时为什么过硫酸铵和temed要最后加入?~
AP为催化剂,TEMED为加速剂,TEMED可以加速AP释放游离O原子(自由基),催化聚丙烯酰胺单体聚合成网状结构。但是两者的量一定适宜,否则会有烧胶或带变形的可能。
在注入分离胶后上面需要加入一层水,这是因为空气中的氧分子会氧化AP使其活性减弱。加入这层水后可以让反应快速进行,同时也保证了分离胶上层面的平整。
因此,我们最后加,防止催化活性的减弱。当然操作快和熟练的这个影响也没那么大。胶能不能制好是个关键,这个受外界环境的影响很大。祝福你跑个好胶。
SDS 破坏蛋白的二硫键使蛋白变性,改变蛋白结构。同时给蛋白附上大量的负电荷。
SDS -page 预制胶,是在塑料胶板里的预先做好的一种胶。就是买来可以直接用的
AB 你是指A、B 液么。一般A液里是丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺、B液一般是SDS和缓冲液,
AP 10%过硫酸铵 催化剂,催化单丙和双丙聚合成聚丙烯酰胺。TEMED 四甲基乙二胺
催凝剂,加速AP 催化作用。
拼音手打伤不起啊~~
#17728714416#
SDS - PAGE时样品中都加什么 - ******
#松泽# 将loading buffer与你的蛋白样品按比例混合,高温变性后,放冰上5分钟后,上样电泳. loading buffer中包含甘氨酸,Tris-Hcl,SDS,甘油,溴酚兰,β-巯基乙醇或二硫苏糖醇(DTT). 甘氨酸和Tris-Hcl用来提供正负离子;SDS是变性剂,同时屏蔽蛋白本来的电荷;β-巯基乙醇或二硫苏糖醇(DTT)为还原剂,进一步打开蛋白间亚结构.
#17728714416#
sds - page需要加sds吗 - ******
#松泽# SDS 是一种阴离子表面激活剂,在蛋白质溶液里加入 SDS 和巯基乙醇后,巯基乙醇能使蛋白质分子中的二硫键还原; SDS 能使蛋白质的氢键、疏水键打开并结合到蛋白质分子上,形成蛋白质 -SDS 复合物.未加SDS的天然聚丙烯酰胺凝胶电泳可以使生物大分子在电泳过程中保持其天然的形状和电荷.
#17728714416#
SDS - page怎么配制 - ******
#松泽# 如果说你要具体的配方的话,我觉得你给的条件少了. 13%指的是丙烯酰胺的终浓度.尽管你给了29:1这个比例,但是你没有说你所配的丙烯酰胺的浓度.丙烯酰胺储液一般有30%和40%的.对于相同的浓度的胶来说,29:1和37.5:1这个比例不会影响到你所需要的储液的量,只有储液的浓度才关系到胶的%.譬如说10ml的胶,我加入1ml的40%的凝胶储液,那么他的浓度就为40%*1/10=4%. tris-hcl给的是终浓度,自己折合下应该加多少buffer就行了.另外SDS你多打了个L. 觉得你把胶配好了应该多看点书,不要光要个答案而不知所以然.
#17728714416#
请教sds - page高手 - ******
#松泽# sds-page常见问题:⒈ 配胶缓冲液系统对电泳的影响?在SDS-PAGE不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲系统,浓缩胶是pH6.7,分离e799bee5baa6e58685e5aeb931333363373737胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲...
#17728714416#
SDS - PAGE制胶时总是凝固的很快,加TEMED太少又担心不凝固,谁遇到过同样的情况 - ******
#松泽# TEMED是增速剂,加少了也不会不凝固.关键是AP的使用,AP只是起到引发反应的作用,加入极少量即可,一般是几个微升,千万不要加多,否则凝固速度过快,来不及灌胶就会凝固,即使能来得及灌胶,制出凝胶也是不均匀的.而且AP要在最后加入,如果配胶之后无法及时灌制,就不要加AP了,到灌胶之前再加入AP混匀.
#17728714416#
sds实验中在分离胶中加水目的是什么 - ******
#松泽# 你是指在配分离胶的时候加水吗?那配胶总是要加水的啊还是说灌好分离胶以后在上面缓慢的注水?那是要利用重力作用把胶压平,然后好灌浓缩胶;否则有气泡什么的胶就不平了
#17728714416#
在不连续体系SDS - PAGE中,当分离胶加完后需在其上加一层水为? ******
#松泽# 这一层水主要是起到保护分离胶的作用
#17728714416#
5%的SDS - PAGE电泳浓缩胶怎么配?各组分的体积是按照什么分? ******
#松泽# (主要分为浓缩胶和分离胶,配方可自己上网查下)(2...使用5X的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液可以减小上样体积,...电泳时电泳液可以使用碧云天生产的SDS-PAGE电泳液
#17728714416#
DNA跑SDS - PAGE用加SDS么 ******
#松泽# 不用加SDS,DNA本身就是带负电荷的.在蛋白质的SDS-PAGE中,SDS是使蛋白变性,使蛋白带上相同的负电荷,使蛋白二级结构打开.这样在电泳中就不会受到蛋白质电荷不同和蛋白质二级结构不同的影响.DNA分子本身就是线性的,而且天然带有负电荷,所以不需要用SDS预先处理.另外啊,SDS可以和蛋白质上的氨基酸残基按照1比1的比例结合,所以不影响到SDS-PAGE中的蛋白质荷比,如果是DNA分子的话,不一定和SDS结合.将聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)用于DNA电泳,主要是因为聚丙烯酰胺凝胶有着比琼脂糖更好的分辨率,可以分辨更小的DNA分子.
#17728714416#
为什么在做原核表达SDS - PAGE时对照的还要做个加诱导剂的呢,那诱导剂加多少才好呢, - ******
#松泽# 因为你做的并不是纯化的蛋白电泳,而是菌体的总蛋白,如果不作对照的话,就不能说明哪个条带是你的目的基因的特异表达. 如果做目的基因不加诱导剂的对照的话,可以看出目的基因在不诱导下的本底表达水平.也可以看出诱导剂的作用.我们实验室就是那么做的,有时候还会加空菌(宿主菌)的对照.